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间充质干细胞三系分化试剂盒8折钜惠
2016-06-21 15:35:04

热烈祝贺麒盟干细胞研究中心成立

经过缜密的筹备与建设,麒盟干细胞研究中心于2016年6月6日正式成立!
为庆祝麒盟干细胞研究中心的成立,即日起至2016年12月31日,所有间充质干细胞相关的服务一律八五折!欢迎有兴趣的朋友来电咨询!
麒盟干细胞研究中心是麒盟生物医药生态圈的重要组成部分,旨在推动干细胞研究的进度,加快组织工程与再生医学向临床的转化速度。目前中心的优势研究方向为间充质干细胞的基础与临床前研究,尤其是间充质干细胞的质量控制体系、基因改造等基础研究和免疫性疾病、神经损伤疾病调节与修复研究等方面具有较深入的研究。
麒盟干细胞研究中心是一个开放的研究机构,除麒盟生物自身的干细胞研究项目外,中心还承接各种干细胞研究的服务,并探索接受多种形式的合作。
麒盟干细胞研究中心目前主要服务有:各物种、组织来源的间充质干细胞的提取与培养服务;间充质干细胞表面标志鉴定服务;间充质干细胞三系分化能力鉴定服务;间充质干细胞特异marker分析服务;间充质干细胞定向诱导分化服务;间充质干细胞相关产品的开发服务;其他相关实验服务。

 

以上内容解释权归麒盟生物所有。
公司地址:上海市浦东新区张衡路1399号4号楼
电话:400-820-4728
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邮箱:chembio@chembio-engine.com
QQ在线:2971094355
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2016年6月6日

2017年9月日———2017年10月31日,基金/课题实验外包签约客户全面8折促销,欢迎广大新老客户接洽,保密承诺、服务品质和质量控制不打折!
间充质成软骨分化试剂盒8折促销,原价1190元,活动期间952元。


产品介绍

间充质干细胞(MSC)具有多向分化的潜能,体外在一定条件下可以诱导分化为脂肪细胞、成骨细胞、成软骨细胞。2006年国际细胞治疗协会(ISCT)确定此三项检测指标是MSC鉴定的必检项目,目前以MSC为基础的研究报道均会对该三个指标进行鉴定。

为方便科研用户鉴定MSC的分化能力,麒盟干细胞研究中心精心优化MSC成脂诱导分化试剂盒,其中包括成脂诱导培养体系和鉴定所需要的染色液,让用户可以稳定有效地鉴定MSC的分化潜能。该试剂盒提供的实验方法为常规鉴定方法,用于鉴定MSC是否具有成骨分化能力。除此以外,试剂盒的诱导培养基还可用于诱导分化过程中的其他检测,如mRNA检测、lncRNA检测、microRNA检测、蛋白表达检测、免疫组化检测等。但若用于免疫荧光检测需注意脂肪颗粒导致的自发荧光或遮光问题。

本产品仅适用于科研。

产品信息
产品名称:人骨髓间充质干细胞成脂分化试剂盒
货号:CHEM-200002
批号:见包装
试剂清单:
序号 名称 数量 货号
A 人骨髓间充质干细胞成脂分化基础培养基A 88 ml ×1 CHEM-200002-A
B 人骨髓间充质干细胞成脂分化血清 10 ml ×2 CHEM-200002-B
C 双抗 1 ml ×2 CHEM-200002-C
D 胰岛素 200 μl ×2 CHEM-200002-D
E 3-异丁基-1-甲基黄嘌呤 200 μl ×1 CHEM-200002-E
F 罗格列酮 100μl ×1 CHEM-200002-F
G 地塞米松 100μl ×1 CHEM-200002-G
H 人骨髓间充质干细胞成脂分化基础培养基B 90 ml ×1 CHEM-200002-H
I 油红O染色液(储液) 5 ml×1 CHEM-200002-I
J 明胶溶液 20 ml ×1 CHEM-100001-20ML
 
存储与有效期:
A、D、H、I、J液于2-8 ℃避光保存,其余溶液于-20 ℃避光保存。所有组分均需要避免反复冻融及复温,各组分在所需要的温度下有效期为1年,配制完成的完全培养基于2-8 ℃保存,有效期为1个月。
产品介绍
人骨髓间充质干细胞(hBMSC)具有多向分化的潜能,体外在一定条件下可以诱导分化为脂肪细胞、成骨细胞、成软骨细胞。2006年国际细胞治疗协会(ISCT)确定此三项检测指标是MSC鉴定的必检项目,目前以MSC为基础的研究报道均会对该三个指标进行鉴定。
为方便科研用户鉴定MSC的分化能力,麒盟干细胞研究中心精心优化hBMSC成脂诱导分化试剂盒,其中包括成脂诱导培养体系和鉴定所需要的染色液,让用户可以稳定有效地鉴定hBMSC的分化潜能。该试剂盒提供的实验方法为常规鉴定方法,用于鉴定hBMSC是否具有成骨分化能力。除此以外,试剂盒的诱导培养基还可用于诱导分化过程中的其他检测,如mRNA检测、lncRNA检测、microRNA检测、蛋白表达检测、免疫组化检测等。但若用于免疫荧光检测需注意脂肪颗粒导致的自发荧光或遮光问题。
本产品仅适用于科研。
操作方法
实验准备
²  试剂配制:
2-8 ℃冰箱中过夜溶解B液一支。
注意:解冻后的血清有时会出现沉淀,这些沉淀不影响血清的质量,不必做过滤等处理。
诱导液A:室温融化C、E、F、G溶液各一支,将融化的溶液加入A液中,然后将B、D液加入A液中,晃动培养基使其充分混匀,配制成诱导液A。
诱导液B:将B、D液加入H液中,晃动培养基使其充分混匀,配置成诱导液B。
油红O染液(工作液):取油红O储液,与蒸馏水以3:2的比例混合均匀,中性滤纸过滤,即配制成了油红O染液(工作液)。
注意:溶液溶解后旋涡混匀、1000 g短时离心以使溶液集中于管底。将管内溶液加入A/H液后,吸取A/H液洗涤溶液瓶两次,将洗涤液加入A/H液中。所有液体混合成诱导完全培养基后必须充分混匀,2-8 保存。E液较难溶解,需提前复温,反复摇动,在加入A液前须保证完全溶解。诱导液B可在需要时现配。整个过程需无菌操作,适当以75%酒精擦拭表面。
²  培养皿处理:
加适量明胶溶液到培养器皿中,轻轻摇动使其覆盖整个培养器皿底面,室温静置30-60分钟。弃去明胶溶液,室温晾干。
注意:本试剂盒建议使用六孔板操作,每孔加明胶溶液1 ml,使用其他培养器皿时需考虑实验结果的稳定性。整个过程需在超净工作台中操作,避免污染。
²  自备试剂:
l  消化液(0.25%Trypsin-0.04%EDTA)
l  磷酸盐缓冲液(DPBS)
l  hBMSC完全培养基
l  4%中性多聚甲醛溶液
注意:hBMSC完全培养基不含血清,则需要准备胰酶抑制剂。hBMSC消化极易过度,建议稀释消化液一倍,且严格控制消化时间。
操作步骤
1.      准备所需诱导分化的hBMSC,当细胞融合达85%左右时,用消化液消化细胞,并用hBMSC完全培养基重悬。
2.      按照3×104 cells/cm2的密度将细胞接种于已明胶处理的六孔板中,每孔hBMSC完全培养基2 ml,37℃、5%CO2培养箱中培养。
注意:细胞密度为该试剂盒的标准密度,若修改细胞接种密度则需要考虑实验结果的稳定性。
3.      当细胞融合达85%时,弃去原培养上清,添加诱导液A 2 ml/well,37℃、5%CO2培养箱中培养。
注意:成脂诱导后细胞易脱壁,换液时完全培养基必须经37 复温。添加培养基时动作要轻柔,避免吹起细胞。
4.      诱导培养72h后弃去原培养上清,添加诱导液B2 ml/well,37℃、5%CO2培养箱中培养。
5.      诱导培养24h后弃去原培养上清,添加诱导液A 2 ml/well,37℃、5%CO2培养箱中培养。
6.      重复步骤4、5约3-5次,待细胞内出现明显脂滴时更换为诱导液B继续培养。
7.      每2天更换新鲜诱导液B,继续培养至脂滴足够大时培养结束。
注意:换液时诱导液必须经过复温,否则影响诱导效果和可能导致细胞脱壁。根据实验需要选择培养结束时间,若成脂面积过大或脂滴过大导致连成片则不利于结果的呈现,建议提前终止。
8.      诱导培养结束时,弃去培养上清,DPBS洗细胞两次,4%中性多聚甲醛溶液2 ml/well室温固定细胞20分钟。
注意:培养结束时或中途可以选择其他检测方法,如基因表达检测等,若采用自己拟定的检测方法则后续方案需要自己拟定。
9.      弃去固定液,DPBS洗2次,加入油红O染液1 ml/well染色15分钟。
注意:该步骤适用于鉴定成脂能力,若出现脂滴(脂肪细胞)则会呈现红色着色。若需要得到美观的图片,则染色时间需自己掌握。
10.  弃去油红O染液,DPBS洗3次。
11.  显微镜下观察并拍照。
12.  结果判定:按照程序操作完毕,低倍镜下观察可见大面积红色着色点,20倍和40倍镜下可观察到红色球形在细胞内的情况,此红色着色球为脂滴,说明实验所用的hBMSC具有成脂能力。否则,所使用的hBMSC无成脂能力。
结果展示
  


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