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组织形态学技术服务
2016-01-06 17:38:13

组织形态学技术服务
     我司为您提供最优质、最专业的组织形态学技术服务,主要包括病理切片的制作、免疫组化、免疫荧光检测及原位杂交等实验。


病理切片

实验原理 
     研究生物体的组织或细胞时,除了某些生物体可用相差显微镜或偏光显微镜等方法达到观察目的外,其余大部分生物体,因为组织较厚,光线不易透过内部等关系而达不到观察的要求,为了达到此目的,就必须将生物体的组织切成薄切片,经过一系列处理,使光线易于透过,即可进行观察。 在制作切片或超薄切片时,由于组织是柔软的,或局部的软硬不均,这样制作厚薄均匀的切片是困难的。所以有必要用一定物质浸透组织内部,整个组织一样硬化,以利于切成薄片。
     石蜡切片法即用石蜡作为支持剂进行切片的方法。石蜡切片法是一般组织学、病理学等常规制片方法,因此用得最多,它有很多优点:比较省时间,容易操作,可切成极薄的切片(4um以下),能制作连续切片,组织块可包埋在石蜡中永久保存。


技术应用 
     石蜡切片是组织学常规制片技术中最为广泛应用的方法。石蜡切片不仅用于观察正常细胞组织的形态结构,也是病理学和法医学等学科用以研究、观察及判断细胞组织的形态变化的主要方法。

实验流程 
     采集标本→固定→冲洗→脱水或保存→透明→透蜡→包埋→修块→切片→贴片机展片→烘干→脱蜡→染色→封片。

实验结果


免疫组化


实验原理 
     免疫组化是应用免疫学基本原理抗原抗体反应,即抗原与抗体特异性结合的原理,通过化学反应使标记抗体的显色剂(荧光素、酶、金属离子、同位素)显色来确定组织细胞内抗原(多肽和蛋白质),对其进行定位、定性及定量的研究。它把免疫反应的特异性、组织化学的可见性巧妙地结合起来,借助显微镜(包括荧光显微镜、电子显微镜)的显像和放大作用,在细胞、亚细胞水平检测各种抗原物质(如蛋白质、多肽、酶、激素、病原体以及受体等)。

技术应用 
     随着免疫组织化学技术的发展和各种特异性抗体的出现,使许多疑难肿瘤得到了明确诊断。在常规肿瘤病理诊断中,5%-10%的病例单靠H.E.染色难以作出明确的形态学诊断。免疫组织化学的应用主要包括以下几方面:
     ⑴恶性肿瘤的诊断与鉴别诊断;
     ⑵确定转移性恶性肿瘤的原发部位;
     ⑶对某类肿瘤进行进一步的病理分型;
     ⑷软组织肿瘤的治疗一般需根据正确的组织学分类,因其种类多、组织形态相像,有时难以区分其组织来源,应用多种标志进行免疫组化研究对软组织肿瘤的诊断是不可缺少的;
     ⑸发现微小转移灶,有助于临床治疗方案的确定,包括手术范围的确定。
     ⑹为临床提供治疗方案的选择。

实验流程


实验结果


免疫荧光检测


实验原理 
免疫荧光是根据抗原抗体反应的原理,先将已知的抗原或抗体标记上荧光素制成荧光标记物,再用这种荧光抗体(或抗原)作为分子探针检查细胞或组织内的相应抗原(或抗体)。在细胞或组织中形成的抗原抗体复合物上含有荧光素,利用荧光显微镜观察标本,荧光素受激发光的照射而发出明亮的荧光,可以看见荧光所在的细胞或组织,从而确定抗原或抗体的性质、定位,以及利用定量技术测定含量。

技术应用 
免疫荧光技术应用范围非常广泛,它可以用于测定内分泌激素、多肽、蛋白质、核酸、受体、神经递质、细胞因子、肿瘤标志物、细胞表面抗原、血药浓度等各种生物活性物质。

实验流程


实验结果

  

原位杂交 
 

实验原理 
原位杂交属于固相分子杂交的范畴,它是用标记的DNA或RNA为探针,在原位检测组织细胞内特定核酸序列的方法。根据所用探针和靶核酸的不同,原位杂交可分为DNA-DNA杂交,DNA-RNA杂交和RNA-RNA杂交三类。
原位杂交或荧光原位杂交技术能在成分复杂的组织中进行单一细胞的研究而不受组织成分的影响,因此对于那些细胞数量少且散在于其他组织中的细胞内DNA或RNA研究更为方便;同时由于原位杂交不需要从组织中提取核酸,对于组织中含量极低的靶序列有极高的敏感性,并可完整地保持组织与细胞的形态,更能准确直接地反映出组织细胞的相互关系及功能状态。

技术应用 
原位杂交优点在与高度特异性,它可测定组织、培养的单个细胞或细胞提取物中的核苷酸含量。

实验流程 
样本的制备→探针的制备→探针标记→杂交→显示→荧光显微镜检测→结果分析

实验结果

 
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