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免疫共沉淀
2016-01-06 17:36:09

     我司提供western、co-ip等蛋白检测实验服务,内容根据客户的要求个性订制,同时也可以做SILCA、蛋白质谱分析等,价格根据实验内容的不同而有所变化。如有需要请电话或邮件联系我们,我们将为您提供优质的技术服务和咨询服务,努力让您得到满意的结果。

免疫共沉淀

实验原理 

     免疫共沉淀(Co-Immunoprecipitation, Co-IP)是以抗体和抗原之间的专一性作用为基础的用于研究蛋白质功能的实验方法。Co-IP是在IP的基础上衍生出来的实验方法,是证明蛋白相互作用的金标准。通过检测免疫沉淀下来的蛋白复合物来证实中是否存在与X蛋白相互作用的Y蛋白。其基本原理是,在细胞裂解液中加入抗X蛋白的抗体,孵育后再加入与抗体FC片段特异结合的Protein A/G-琼脂糖微珠,若细胞中有与Y结合的X蛋白,就可以形成这样一种复合物: Y—X—抗X抗体—Protein A或G ,经变性聚丙烯酰胺凝胶电泳,复合物又被分开。然后经免疫印迹或质谱检测目的蛋白。这种方法得到的目的蛋白是在细胞内与兴趣蛋白天然结合的,符合体内实际情况,得到的结果可信度高。

技术应用  
     免疫共沉淀一般用于低丰度蛋白的富集和浓缩,为 SDS-PAGE 和 MS 质谱分析鉴定准备样品。

实验流程 
     蛋白样品制备→抗原抗体结合反应→Protein A/G与抗原抗体复合物结合→免疫复合物与protein A/G解离→分析鉴定(SDS-PAGE、western-blotting、质谱仪分析)

实验结果

 


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