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免疫学技术服务
2016-01-06 17:35:05

免疫学技术服务
     我司为您提供最优质、最专业的免疫学技术服务,主要包括Elisa、western blot、免疫共沉淀、免疫组织化学、免疫荧光和抗原抗体制备等实验。如有需要请电话或邮件联系我们,我们将竭力以合适的价格和可靠的数据让您得到满意的结果。 

Elisa

实验原理 

     ELISA是以免疫学反应为基础,将抗原、抗体的特异性反应与酶对底物的高效催化作用相结合起来的一种敏感性很高的试验技术。由于抗原、抗体的反应在一种固相载体──聚苯乙烯微量滴定板的孔中进行,每加入一种试剂孵育后,通过洗涤除去多余的游离反应物,从而保证试验结果的特异性与稳定性。在实际应用中,通过不同的设计,具体的方法步骤可有多种。即:用于检测抗体的间接法、用于检测抗原的双抗体夹心法以及用于检测小分子抗原或半抗原的抗原竞争法等等。比较常用的是ELISA双抗体夹心法及ELISA间接法。 

技术应用 
     ELISA 法具有灵敏、特异、简单、快速、稳定及易于自动化操作等特点,在生物医学各领域的应用范围日益扩大,可概括四个方面:
     1、免疫酶染色各种细胞内成份的定位。
     2、研究抗酶抗体的合成。
     3、显现微量的免疫沉淀反应。
     4、定量检测体液中抗原或抗体成份。


实验流程


实验结果

 
 

免疫共沉淀 


实验原理 

     免疫共沉淀(Co-Immunoprecipitation, Co-IP)是以抗体和抗原之间的专一性作用为基础的用于研究蛋白质功能的实验方法。Co-IP是在IP的基础上衍生出来的实验方法,是证明蛋白相互作用的金标准。通过检测免疫沉淀下来的蛋白复合物来证实中是否存在与X蛋白相互作用的Y蛋白。其基本原理是,在细胞裂解液中加入抗X蛋白的抗体,孵育后再加入与抗体FC片段特异结合的Protein A/G-琼脂糖微珠,若细胞中有与Y结合的X蛋白,就可以形成这样一种复合物: Y—X—抗X抗体—Protein A或G ,经变性聚丙烯酰胺凝胶电泳,复合物又被分开。然后经免疫印迹或质谱检测目的蛋白。这种方法得到的目的蛋白是在细胞内与兴趣蛋白天然结合的,符合体内实际情况,得到的结果可信度高


技术应用  

     免疫共沉淀一般用于低丰度蛋白的富集和浓缩,为 SDS-PAGE 和 MS 质谱分析鉴定准备样品


实验流程 

     蛋白样品制备→抗原抗体结合反应→Protein A/G与抗原抗体复合物结合→免疫复合物与protein A/G解离→分析鉴定(SDS-PAGE、western-blotting、质谱仪分析)


实验结果

 

 

抗原抗体制备 

实验原理 

     抗体(antibody,Ab)是机体免疫系统受到抗原刺激后产生的特异性球蛋白,称免疫球蛋白(immunoglobulin,Ig)。根据其重链稳定区的分子结构和抗原性的不同,可将为类Ig分为IgG、IgA、IgM、IgD和IgE等五大类。由遗传基因决定所产生的抗体,称天然抗体(natural antibody),由抗原激发免疫细胞产生的抗体,称免疫抗体(immune antibody)或称特异地性抗体。人工制备的特异性抗体又可分为多克隆抗体、单克隆抗体和基因工程抗体三种类型。
Kohler和Milstein建立了淋巴细胞杂交瘤技术,用预定抗原免疫的小鼠脾细胞与能在体外培养中无限制生长的骨髓瘤细胞融合,形成B细胞杂交瘤。这种杂交瘤细胞具有双亲细胞的特征,既像骨髓瘤细胞一样在体外培养中能无限地快速增殖且永生不死,又能像脾淋巴细胞那样合成和分泌特异性抗体。通过克隆化可得到来自单个杂交瘤细胞的单克隆系,即杂交瘤细胞系,它所产生的抗体是针对同一抗原决定簇的高度同质的抗体,即所谓单克隆抗体(monoclonal antibody)

技术应用 
     单克隆抗体问世以来,以其特异性强、纯度高、均一性好等优点由于其独有的特征已迅速应用于医学、生物学很多领域。主要表现在以下几个方面。
     1.检验医学诊断试剂,广泛应用于酶联免疫吸附试验放射免疫分析、免疫组化和流式细胞仪等技术。      ①病原微生物抗原、抗体的检测;②肿瘤抗原的检测;③免疫细胞及其亚群的的检测;④激素测定;⑤细胞因子的测定。

实验流程

 


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