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Westerm blot检测
2015-12-21 11:26:13

Western blot检测

实验原理 

     Western Blot,即蛋白质印迹法,又称为免疫印迹法,是一种可以检测固定在固相载体上蛋白质的免疫化学技术方法。Western Blot采用的是聚丙烯酰胺凝胶电泳,被检测物是蛋白质,“探针”是抗体,“显色”用标记的二抗。经过PAGE分离的蛋白质样品,转移到固相载体(例如硝酸纤维素薄膜)上,固相载体以非共价键形式吸附蛋白质,且能保持电泳分离的多肽类型及其生物学活性不变。以固相载体上的蛋白质或多肽作为抗原,与对应的抗体起免疫反应,再与酶或同位素标记的第二抗体起反应,经过底物显色或放射自显影以检测电泳分离的特异性目的基因表达的蛋白成分。

技术应用 
     Western Blot法应用于分子生物学、生物化学和免疫遗传学,可对目标蛋白进行定性和半定量的分析;对非放射性标记蛋白组成的复杂混合物中的某些特定蛋白质进行鉴定和定量;还可用于蛋白-蛋白、蛋白-DNA和蛋白-RNA相互作用的后续分析。 

实验流程

 

实验结果

                                           
                                     KLT 对异种移植瘤 PI3K-AKT-mTOR 信号通路的影响

 

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