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CBA检测
2016-01-06 17:18:04

实验原理
     Cytometric Bead Array (CBA),即微量样本多重蛋白定量技术,是一个基于流式细胞检测系统的多重蛋白定量检测方法。它能够同时对单个样品中的多个指标进行检测。日常实验中,常需对溶液体系中的可溶性蛋白进行定量检测,如细胞培养上清或血清血浆中的细胞因子含量的定量分析。由于这些因子的含量较少,低于一般常规方法的检测下限,使用传统的蛋白检测方法很难检测。同时由于样本量少,一次只检测一个因子的方法难以实现多个因子的检测,而且费时。BD公司利用流式细胞仪对荧光信号检测的高灵敏性,以及同时可区别多种荧光及多种荧光强度的特性,将受检的可溶性因子附着于一些具有近似细胞直径的微粒上,即可对受检样品中的多种可溶性因子进行检测。为此,BD公司开发了的微量样本多重蛋白定量系统,简称CBA系统。首先利用一系列带有荧光标记的微球连结特定的捕获抗体以捕捉溶液系统中的待测物,然后再通过相对应的各种不同检测物特异微球上的不同荧光强度同时定量测定分析样本中多种可溶性成分。
 BD的CBA系统的工作原理简单,对应受检系统中的每一个检测指标都有不同的捕获微球。不同的捕获微球上包被有特异的捕获抗体,并具有不同的荧光强度。捕获微球与待测样品溶液混合后,微球上的特异性抗体首先与样品(血清、血浆或细胞培养液) 中的相应抗原或蛋白结合。然后,与加入的荧光标记的检测抗体形成“三明治”夹心复合物,通过流式细胞仪进行荧光检测。对样品中的各检测因子的含量进行分析。
 检测的样本为组织培养上清、EDTA抗凝血浆和血清样本中特定细胞因子(pg/ml)。

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