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细胞培养中的的支原体污染
支原体是一种大小仅为0.2~0.3μm,无细胞壁,可透过一般过滤膜(0.22~0.45μm)的原核生物。
支原体是让每个细胞培养者崩溃的家伙。因为它极小,可以很轻松的通过滤膜,混入培养系统中,而且没有细胞壁,可以轻而易举的躲过抗生素,就这样悄无声息的杀死细胞,与细菌和真菌相比,支原体造成的污染不论在检测、预防还是去除上都更为困难。细胞培养过程中一旦有支原体污染,轻则实验失败,重则整个实验系统被污染,严重影响实验的进程,劳心劳力。
为避免不必要的损失,细胞培养过程中要预防支原体的污染,以下是一些预防支原体污染的实践经验:
1、从源头上遏制支原体,当有新细胞进入培养系统时,必须进行支原体检测,确定无污染后才能进行正常的培养,实验。
2、所有进入细胞库的细胞都必须确保无支原体污染。
3、人体是最大的支原体携带者,因此进入细胞培养室时,必须穿细胞室专用实验服,戴口罩、手套、帽子,女生的长发一律不可露在外边。
4、培养每株细胞所用的培养试剂都需分开使用,避免交叉污染。
5、细胞培养室必须进行定期的消毒,并定期对培养系统进行支原体检测。
6、支原体污染后,不会使细胞死亡,可以与细胞长期共存,培养基一般不发生混浊,细胞无明显变化,外观上给人以正常感,实则细胞已受到多方面的潜在影响,如引起细胞变形,影响DNA合成,抑制细胞生长等,在培养过程中,若发现细胞状态不对,破碎细胞甚多,必须立马进行支原体检测,切不可延误,有报道称25%的细胞都存在支原体污染。

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