细胞生长曲线测定常见问题 - 实验技术 - 麒盟干细胞中心
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细胞生长曲线测定常见问题
1、  问:测定细胞生长曲线的意义是什么?
答:细胞生长曲线是测定细胞绝对生长数的常用方法,也是判定细胞活力的重要指标,是培养细胞生物学特性的基本参数之一。因为细胞太小,无法测单个细胞的生长状态,所以测细胞群体的生长曲线。
2、  问:如何选择细胞接种数?
   答:可根据细胞传代培养过程中接种数及细胞生长周期进行计算,细胞接种数因细胞的不同而不同。
3、细胞计数时为什么要用台盼蓝染色?
答:加入台盼蓝后,活细胞不着色,台盼蓝着色的细胞呈深蓝色,是不健康或已死亡的细胞,不能计数。
4、细胞生长曲线测定时为什么要做重复孔?
   答:测定细胞生长曲线细胞计数时选择3个复孔,每孔分别计三次,取其平均值,目的是减小操作误差。
5、细胞生长曲线测定周期是几天?
   答:一般是一个星期。
6、为什么绘制的细胞生长曲线没有达到平台期?
   答:可能有以下原因:一是细胞接种密度过低;二是细胞培养时间过短;三是细胞生长状态不好,使其不能正常增殖。
7、为什么细胞计数第一天,细胞数没有增加反而减少?
   答:一般细胞传代后,会有一个生长缓慢的潜伏期,细胞不增殖,而细胞会有正常的死亡,故细胞数不增加反而减少。
8、细胞生长曲线还有其他方法绘制吗?
答:当然有。我们提到最多的是直接计数的方法,除此以外还有相对计数的方法,该类方法首先要绘制标准曲线,标定细胞数和某个变量的函数关系,然后我们只需要测定每天这个变量的值便可以计算出细胞数。常用的是MTT、CCK8等比色的方法。

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