间充质干细胞(MSC)三系诱导分化试剂盒 - 干细胞诱导分化产品 - 上海麒盟生物科技有限公司
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名称:间充质干细胞(MSC)三系诱导分化试剂盒
货号:CHEM-2000**
品牌:麒盟
详情:见说明书
规格:200ml
价格:1190/3160
联系方式:chembio@chembio-engine.com    QQ: 点击这里给我发消息
间充质干细胞三系分化试剂盒
仅供科研使用
 
序号 产品编号 产品名称(中文)
1 CHEM-200001 人骨髓间充质干细胞成骨分化试剂盒
2 CHEM-200002 人骨髓间充质干细胞成脂分化试剂盒
3 CHEM-200003 人骨髓间充质干细胞成软骨分化试剂盒
4 CHEM-200004 人脂肪间充质干细胞成骨分化试剂盒
5 CHEM-200005 人脂肪间充质干细胞成脂分化试剂盒
6 CHEM-200006 人脂肪间充质干细胞成软骨分化试剂盒
7 CHEM-200007 人脐带间充质干细胞成骨分化试剂盒
8 CHEM-200008 人脐带间充质干细胞成脂分化试剂盒
9 CHEM-200009 人脐带间充质干细胞成软骨分化试剂盒
10 CHEM-200010 人羊膜间充质干细胞成骨分化试剂盒
11 CHEM-200011 人羊膜间充质干细胞成脂分化试剂盒
12 CHEM-200012 人羊膜间充质干细胞成软骨分化试剂盒
13 CHEM-200013 大鼠骨髓间充质干细胞成骨分化试剂盒
14 CHEM-200014 大鼠骨髓间充质干细胞成脂分化试剂盒
15 CHEM-200015 大鼠骨髓间充质干细胞成软骨分化试剂盒
16 CHEM-200016 大鼠脂肪间充质干细胞成骨分化试剂盒
17 CHEM-200017 大鼠脂肪间充质干细胞成脂分化试剂盒
18 CHEM-200018 大鼠脂肪间充质干细胞成软骨分化试剂盒
19 CHEM-200019 小鼠骨髓间充质干细胞成骨分化试剂盒
20 CHEM-200020 小鼠骨髓间充质干细胞成脂分化试剂盒
21 CHEM-200021 小鼠骨髓间充质干细胞成软骨分化试剂盒
22 CHEM-200022 小鼠脂肪间充质干细胞成骨分化试剂盒
23 CHEM-200023 小鼠脂肪间充质干细胞成脂分化试剂盒
24 CHEM-200024 小鼠脂肪间充质干细胞成软骨分化试剂盒
25 CHEM-200025 猪骨髓间充质干细胞成骨分化试剂盒
26 CHEM-200026 猪骨髓间充质干细胞成脂分化试剂盒
27 CHEM-200027 猪骨髓间充质干细胞成软骨分化试剂盒
28 CHEM-200028 猪脂肪间充质干细胞成骨分化试剂盒
29 CHEM-200029 猪脂肪间充质干细胞成脂分化试剂盒
30 CHEM-200030 猪脂肪间充质干细胞成软骨分化试剂盒
 

间充质干细胞(MSC)三系诱导分化试剂盒产品介绍:
间充质干细胞(MSC)具有多向分化的潜能,体外在一定条件下可以诱导分化为脂肪细胞、成骨细胞、成软骨细胞。2006年国际细胞治疗协会(ISCT)确定此三项检测指标是MSC鉴定的必检项目,目前以MSC为基础的研究报道均会对该三个指标进行鉴定。

为方便科研用户鉴定MSC的分化能力,麒盟干细胞研究中心精心优化MSC成脂诱导分化试剂盒,其中包括成脂诱导培养体系和鉴定所需要的染色液,让用户可以稳定有效地鉴定MSC的分化潜能。该试剂盒提供的实验方法为常规鉴定方法,用于鉴定MSC是否具有成骨分化能力。除此以外,试剂盒的诱导培养基还可用于诱导分化过程中的其他检测,如mRNA检测、lncRNA检测、microRNA检测、蛋白表达检测、免疫组化检测等。但若用于免疫荧光检测需注意脂肪颗粒导致的自发荧光或遮光问题。

间充质干细胞成脂分化试剂盒
间充质干细胞成脂分化试剂盒产品信息
产品名称:间充质干细胞成脂分化试剂盒
货号:CHEM-2000**
试剂清单:
序号 名称 数量 货号
A ***间充质干细胞成脂分化基础培养基A 1 CHEM-200002-A
B ***间充质干细胞成脂分化血清 2 CHEM-200002-B
C 双抗 2 CHEM-200002-C
D 胰岛素 2 CHEM-200002-D
E 3-异丁基-1-甲基黄嘌呤 1 CHEM-200002-E
F 罗格列酮 1 CHEM-200002-F
G 地塞米松 1 CHEM-200002-G
H ***间充质干细胞成脂分化基础培养基B 1 CHEM-200002-H
I 油红O染色液(储液) 1 CHEM-200002-I
J 明胶溶液 1 CHEM-100001-J
 
间充质干细胞成脂分化试剂盒存储与有效期:
A、D、H、I、J液于2-8 ℃避光保存,其余溶液于-20 ℃避光保存。所有组分均需要避免反复冻融及复温,各组分在所需要的温度下有效期为1年,配制完成的完全培养基于2-8 ℃保存,有效期为1个月。

间充质干细胞成脂分化试剂操作方法
实验准备
1、试剂配制:2-8 ℃冰箱中过夜溶解B液一支。
诱导液A:室温融化C、E、F、G溶液各一支,将融化的溶液加入A液中,然后将B、D液加入A液中,晃动培养基使其充分混匀,配制成诱导液A。
诱导液B:将B、D液加入H液中,晃动培养基使其充分混匀,配置成诱导液B。
油红O染液(工作液):取油红O储液,与蒸馏水以3:2的比例混合均匀,中性滤纸过滤,即配制成了油红O染液(工作液)。

2、培养皿处理:
加适量明胶溶液到培养器皿中,轻轻摇动使其覆盖整个培养器皿底面,室温静置30-60分钟。弃去明胶溶液 ,室温晾干。
 
3、自备试剂:
l  消化液(0.25%Trypsin-0.04%EDTA )
l  磷酸盐缓冲液(DPBS)
l  **MSC完全培养基
l  4%中性多聚甲醛溶液

操作步骤
1.      准备所需诱导分化的**MSC,当细胞融合达85%左右时,用消化液消化细胞,并用**MSC完全培养基重悬。
2.      按照3×104 cells/cm2的密度将细胞接种于已明胶处理的六孔板中,每孔**MSC完全培养基2 ml,37℃、5%CO2培养箱中培养。
3.      当细胞融合达85%时,弃去原培养上清,添加诱导液A 2 ml/well,37℃、5%CO2培养箱中培养。
4.      诱导培养72 h后弃去原培养上清,添加诱导液B 2 ml/well,37℃、5%CO2培养箱中培养。
5.      诱导培养24 h后弃去原培养上清,添加诱导液A 2 ml/well,37℃、5%CO2培养箱中培养。
6.      重复步骤4、5约3-5次,待细胞内出现明显脂滴时更换为诱导液B继续培养。
7.      每2天更换新鲜诱导液B,继续培养至脂滴足够大时培养结束。
8.      诱导培养结束时,弃去培养上清,DPBS洗细胞两次,4%中性多聚甲醛溶液2 ml/well室温固定细胞20分钟。
9.      弃去固定液,DPBS洗2次,加入油红O染液1 ml/well染色15分钟。
10.  弃去油红O染液,DPBS洗3次。
11.  显微镜下观察并拍照。

结果判定:
按照程序操作完毕,低倍镜下观察可见大面积红色着色点,20倍和40倍镜下可观察到红色球形在细胞内的情况,此红色着色球为脂滴,说明实验所用的**MSC具有成脂能力。否则,所使用的**MSC无成脂能力。

结果展示

   


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**间充质干细胞成骨分化试剂盒 CHEM-2000**
**间充质干细胞成软骨分化试剂盒 CHEM-2000**
 

间充质干细胞成骨分化试剂盒

间充质干细胞成骨分化试剂盒产品信息
产品名称:间充质干细胞成骨分化试剂盒
货号:CHEM-2000**
试剂清单:
序号 名称 数量 货号
A ***间充质干细胞成骨分化培养基 2 CHEM-200001-A
B ***间充质干细胞成骨分化血清 2 CHEM-200001-B
C 双抗 2 CHEM-200001-C
D 抗坏血酸 2 CHEM-200001-D
E β-甘油磷酸钠 2 CHEM-200001-E
F 地塞米松 2 CHEM-200001-F
G 茜素红染液 1 CHEM-200001-G
H 明胶溶液 2 CHEM-100001-H
 
间充质干细胞成骨分化试剂盒存储与有效期:
A、G、H液于2-8 ℃避光保存,B-F液于-20 ℃避光保存。所有组分均需要避免反复冻融及复温,各组分在所需要的温度下有效期为1年,配制完成的完全培养基于2-8 ℃保存,有效期为2个月。

操作方法
实验准备
1、  试剂配制:
室温融化C、D、E、F溶液,将融化的溶液加入A液中,然后将B液加入A液中,充分混匀。

2、培养皿处理:
加适量明胶溶液到培养器皿中,轻轻摇动使其覆盖整个培养器皿底面,室温静置30-60分钟。弃去明胶溶液 ,室温晾干。

3、 自备试剂:
l  消化液(0.25%Trypsin-0.04%EDTA )
l  磷酸盐缓冲液(DPBS)
l  **MSC完全培养基
l  4%中性多聚甲醛溶液

操作步骤
12.  准备所需诱导分化的**MSC,当细胞融合达85%左右时,用消化液消化细胞,并用**MSC完全培养基重悬。
13.  按照4×104 cells/cm2的密度将细胞接种于已明胶处理的六孔板中,每孔**MSC完全培养基2 ml,37℃、5%CO2培养箱中培养。
14.  当细胞融合达60%时,弃去培养上清,每孔添加**MSC成骨诱导分化完全培养基2 ml/well,37℃、5%CO2培养箱中培养。
15.  每3天更换新鲜的**MSC成骨诱导分化完全培养基,持续培养2-4周。
16.  诱导培养结束时,弃去培养上清,DPBS洗细胞两次,4%中性多聚甲醛溶液2 ml/well室温固定细胞20分钟。
17.  弃去固定液,DPBS洗2次,加入茜素红染液1 ml/well染色15分钟。
18.  弃去茜素红染液,DPBS洗3次。
19.  显微镜下观察并拍照。

结果判定:
按照程序操作完毕,低倍镜下观察可见红色着色点,此处为钙结节,说明实验所用的**MSC具有成骨能力。否则,所使用的**MSC无成骨能力。

结果展示

   

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间充质干细胞成软骨分化试剂盒产品信息
产品名称:间充质干细胞成软骨分化试剂盒
货号:CHEM-2000**
试剂清单:
序号 名称 数量 货号
A ***间充质干细胞成软骨分化基础培养基 2 CHEM-200015-A
B 双抗 2 CHEM-200015-B
C 抗坏血酸 2 CHEM-200015-C
D 丙酮酸钠 2 CHEM-200015-D
E 地塞米松 2 CHEM-200015-E
F 脯氨酸 2 CHEM-200015-F
G ITS+Premix 2 CHEM-200015-G
H TGF-β3 2 CHEM-200015-H
I 阿利新蓝染色液 1 CHEM-200015-I
 
间充质干细胞成软骨分化试剂盒存储与有效期:
A、E、J液于2-8 ℃避光保存,其余溶液于-20 ℃(或更低温度)避光保存。所有组分均需要避免反复冻融及复温,I液有效期为6个月,其他组分在所需要的温度下有效期为1年。预混液于2-8 ℃保存,有效期为1个月,完全培养基现配现用。

操作方法
实验准备
1、试剂配制:
预混液:室温融化B-G溶液各一支,将融化的溶液B-G加入A液中,晃动培养基使其充分混匀,配制成软骨分化培养基预混液。
TGF-β3分装:室温溶解I液,根据每次换液需要的试剂量分装成小份,-20℃或更低温度保存。
诱导完全培养基:按照当次所需要的诱导液总量取相应的预混液与离心管中,加入相应量的TGF-β3,充分混匀制成诱导完全培养基,此液现配现用。1 ml预混液需添加TGF-β3的量为10 μl。

2、自备试剂:
l  消化液(0.25%Trypsin-0.04%EDTA)
l  磷酸盐缓冲液(DPBS)
l  **MSC完全培养基
l  4%中性多聚甲醛溶液

操作步骤
20.  准备所需诱导分化的**MSC,当细胞融合达85%左右时,用消化液消化细胞,细胞沉淀用成软骨诱导预混液重悬。
21.  150 g离心5 min,沉淀以预混液重悬,细胞密度约1×106 cells/ml,再次离心,弃上清。
22.  沉淀以成软骨诱导完全培养基重新悬浮,调整细胞密度为5×105 cells/ml。
23.  分别取500 μl细胞悬液接种于15 ml离心管中,150 g离心5 min。
24.  旋松离心管盖,将离心管轻轻置于37 ℃、5% CO2培养箱中静置培养。
25.  诱导培养24 h后,轻轻拨动离心管底,使细胞沉淀团块悬浮,重新放回培养箱继续培养。
26.  每2天更换新鲜完全诱导培养基。换液时轻轻吸取旧培养基,每管加新鲜配制的成软骨分化完全培养基500 μl。
27.  诱导培养结束时,弃去培养上清,DPBS洗细胞两次,4%中性多聚甲醛溶液2 ml/管室温固定细胞1小时。
28.  弃去固定液,DPBS洗2次,脱水、石蜡包埋后切片。
29.  阿利新蓝染色:将切片进行脱腊和复水,阿利新蓝染液染色30 min,流水冲洗5 min,脱水、透明、中性树胶封片,显微镜下观察、拍照。

结果判定:
按照程序操作完毕,低倍镜下观察可见蓝色着色,该蓝色染色的为酸性粘多糖,说明实验所用的**MSC具有成软骨能力。否则,所使用的**MSC无成软骨能力。

结果展示
相关产品
名称 货号
***间充质干细胞成骨分化试剂盒 CHEM-2000**
***间充质干细胞成脂分化试剂盒 CHEM-2000**

 

 
温馨提示:不可用于临床治疗。


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